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血管內(nèi)皮由一層薄薄的 扁平細(xì)胞所組成,它形成血管的內(nèi)壁,是血管管腔內(nèi) 血液及其他血管壁(單層鱗狀上皮) 的接口。 血管 內(nèi)皮細(xì)胞的損傷與多種心血管疾病的發(fā)生發(fā)展有著 密切的關(guān)系,如高血壓、動脈粥樣硬化、心力衰竭 等 。 糖尿病常并發(fā)大血管或微血管病變,導(dǎo)致糖 尿病心肌病、糖尿病腎病、視網(wǎng)膜并發(fā)癥等,這些病 理過程常與血管內(nèi)皮損傷緊密相關(guān) 。ZHJH?C1112C 型超凈工作臺 (上海智城分析儀器制造有限公司);HERA CELL VIOS 160 i 型恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱、酶標(biāo)儀、高速低溫離 心機(jī)(美國 Thermo Fisher Scientific 公司); - 80 ℃ 超低溫冰箱(日本 SANYO 電器股份有限公司);電 泳儀及電泳槽(北京六一儀器廠);全自動數(shù)碼凝膠 成像系統(tǒng)(上海歐翔公司);TDZ4?WS 低速自動平衡 離心機(jī)(長沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司);磁力攪拌器(北京中興偉業(yè)儀器有限公司);電熱恒溫干燥箱 (上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠);pH 儀(上海雷磁儀器廠); CytoFLEX 流式細(xì)胞儀(美國 BECKMAN COULTER 公司)。
可以通過檢 測細(xì)胞內(nèi) ROS 生成的變化來判斷內(nèi)皮損傷的程度。 在本實驗中,高糖刺激下的內(nèi)皮細(xì)胞中 ROS 生成量 增加,MLT 干預(yù)后 ROS 生成量相對下降。 上述實驗 表明 MLT 可以減少內(nèi)皮細(xì)胞中 ROS 的產(chǎn)生,從而 緩解高糖刺激對內(nèi)皮功能的損傷。 Hoechst 33342 可以穿透細(xì)胞膜,染色后凋亡細(xì)胞藍(lán)色熒光會比正 常細(xì)胞增強(qiáng)。 PI 不能穿透細(xì)胞膜,對于壞死細(xì)胞, 其細(xì)胞膜的完整性遭到破壞,PI 可以進(jìn)入壞死細(xì)胞 對核染色,使細(xì)胞紅色熒光增強(qiáng)。